vector vector vector
4157

Molecular detection and quantification of Hepatitis B virus DNA

Μοριακή ανίχνευση & ποσοτικός προσδιορισμός DNA του ιού της Ηπατίτιδας B

Κλινική χρησιμότητα:
Επιβεβαίωση της χρόνιας λοίμωξης από τον ιό της ηπατίτιδας Β (HBV), ο οποίος αποτελεί και το κυριότερο αιτιοπαθογόνο ιϊκής ηπατίτιδας.

Διαχείριση ασθενών με χρόνια HBV λοίμωξη (ανιχνεύσιμο HBV DNA στο αίμα). Μέσω της ποσοτικοποίησης των επιπέδων του ιϊκού φορτίου πριν και κατά την διάρκεια της χορήγησης αντι-ιϊκής θεραπείας, δύναται να εκτιμηθεί η ανταπόκριση σε αυτή και να παρακολουθηθεί η εξέλιξη της νόσου.

Προετοιμασία εξεταζόμενου:
Δεν υπάρχει καμία ειδική διαιτητική απαίτηση πριν από τη συλλογή δείγματος

Δείγμα

Πλάσμα EDTA ή ορός που συλλέγεται σε συνήθη σωληνάρια δειγματοληψίας ή σε σωληνάρια που περιέχουν γέλη διαχωρισμού χωρίς έντονη αιμόλυση, ίκτερο και έντονη λιπαιμικότητα. Το δείγμα φυγοκεντρείται και αποχωρίζεται ο ορός από το θρόμβο ή τα κύτταρα, ιδανικά εντός 2 ωρών (εάν δεν είναι αυτό εφικτό, ο μέγιστος αποδεκτός χρόνος είναι οι 6 ώρες)
Ελάχιστος όγκος : 2mL

Μη αποδεκτό δείγμα:Δείγματα πλάσματος με αντιπηκτικά εκτός EDTA, αιμολυμένα δείγματα, δείγματα που δεν διαχωρίζονται εντός 6 ωρών από τη συλλογή τους ή δείγματα που εκτίθενται σε επαναλαμβανόμενη κατάψυξη/ απόψυξη.

Μεταφορά Δείγματος:Από τη στιγμή της αιμοληψίας, τα δείγματα φυγοκεντρούνται εντός 2 ωρών και το δείγμα ορού/πλάσματος φυλάσσεται σε θερμοκρασία 2 - 8 °C το πολύ έως 24 - 48 ώρες (μεταφορά σε συνθήκες ψύξης μέσα στο συγκεκριμένο διάστημα) ή ≤ - 20 °C το πολύ έως 6 εβδομάδες (μεταφορά σε συνθήκες κατάψυξης).
Συνιστάται η άμεση κατάψυξη των δειγμάτων για την ασφαλέστερη μεταφορά τους.

Σταθερότητα δείγματος

2-8°C : 24-48 ώρες

≤ - 20 °C : 6 εβδομάδες

Μέθοδος

Real Time-PCR Cobas 5800, Roche

Τιμές αναφοράς

Εκφράζονται  σε  *IU/ mL

Μη ανιχνεύσιμο HΒV DNA

*1 IU/mL αντιστοιχεί σε  5.82 copies

 

Κατώτατο Όριο Ποσοτικοποίησης: 10 IU/mL
Γραμμικότητα: 10 – 1.000.000.000 IU/mL
Ειδικότητα: 100,0% (μονόπλευρο διάστημα εμπιστοσύνης 95% – 99,5%)
Κατώτατο όριο ανίχνευσης μεθόδου: 3 IU/mL

Τι επηρεάζει

Τα φυγοκεντρημένα & διαχωρισμένα δείγματα πλάσματος/ορού είναι σταθερά το πολύ έως τρεις κύκλους κατάψυξης/απόψυξης, όταν φυλάσσονται καταψυγμένα σε θερμοκρασία ≤ - 20 °C.

Παρατηρήσεις

O ιός HBV προκαλεί ιική ηπατίτιδα. Ασθενείς με χρόνια HBV λοίμωξη παρουσιάζουν υψηλό κίνδυνο μακροχρόνιων επιπλοκών της λοίμωξης, συμπεριλαμβανομένων της χρόνιας ηπατίτιδας, της κίρρωσης του ήπατος και του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος. Οι ορολογικοί δείκτες χρησιμοποιούνται ευρέως ως διαγνωστικοί και/ή προγνωστικοί δείκτες οξείας ή χρόνιας μόλυνσης HBV. Ο πιο κοινός δείκτης της HBV λοίμωξης είναι η παρουσία του επιφανειακού αντιγόνου (HBsAg) του ιού. Αν και στους φορείς ενδέχεται να σημειωθεί κάθαρση του HBsAg και ανάπτυξη αντισώματος σε αυτό, φαίνεται ότι υπάρχει ακόμη κίνδυνος για σοβαρές επιπλοκές του ήπατος αργότερα στη ζωή τους. Το αντιγόνο e του HBV (HBeAg) χρησιμοποιείται γενικά ως δευτερεύων δείκτης ενεργού πολλαπλασιασμού που σχετίζεται με προοδευτική ηπατική νόσο. Η αποτυχία κάθαρσης του HBeAg φαίνεται ότι αυξάνει τον κίνδυνο ηπατικής νόσου τελικού σταδίου. Οι παραλλαγές στελεχών των προπυρηνικών μεταλλάξεων του HBV μπορούν να χάσουν την ικανότητα να παράγουν HBeAg, ακόμα και υπό την παρουσία ενεργού λοίμωξης, με αποτέλεσμα να περιορίζεται η χρήση αυτού του δείκτη για την παρακολούθηση της εξέλιξης της νόσου. Η ποσοτικοποίηση του γενετικού υλικού του ιού (HBV-DNA) δύναται να συμβάλλει στην αξιολόγηση της ανταπόκρισης στη θεραπεία των ασθενών, κυρίως λόγω της αυξημένης ευαισθησίας και του μεγαλύτερου εύρους γραμμικότητας. Η παρουσία του HBV DNA στον ορό είναι ένας αξιόπιστος δείκτης της ενεργούς αντιγραφής του ιού. Τα επίπεδα του HBV DNA είναι ,   ανιχνεύσιμα μετά τη διέλευση 30 ημέρων από τη λοίμωξη, κορυφώνονται συνήθως κατά τη στιγμή της οξείας ηπατίτιδας, μειώνονται σταδιακά και εξαφανίζονται όταν η λοίμωξη υποχωρεί από μόνη της. Ποσοτικό αποτέλεσμα εκφραζόμενο σε ΙU/mL υποδεικνύει το βαθμό  του ενεργού πολλαπλασιασμού του ιού της ηπατίτιδας Β στον ασθενή. Ο έλεγχος των επιπέδων HBV DNA με την ίδια μέθοδο ποσοτικού προσδιορισμού με την πάροδο του χρόνου καθίσταται σημαντικός για την παρακολούθηση της εξέλιξης της νόσου στον ασθενή ή/και για την ανταπόκριση αυτού στη σχετική χορηγούμενη φαρμακευτική αγωγή.

Εκτέλεση

Έως 7 εργάσιμες ημέρες

Newsletter

Συντονιστείτε με τον Συνεταιρισμό και τις εργαστηριακές εξελίξεις. Ενημερωθείτε για τις εξατομικευμένες προτάσεις μας.

Μπορείτε να απεγγραφείτε ανά πάσα στιγμή από το σύνδεσμο στο κάτω μέρος των emails μας. Δείτε την πολιτική απορρήτου.