|
Hepatitis C Virus Recombinant Immunoblot Assay (HCV RIBA), Hepatitis C Confirmation
|
| Κλινική χρησιμότητα |
Για επιβεβαίωση της παρουσίας αντι-HCV αντισωμάτων σε ασυμπτωματικά άτομα και σε άτομα με μη ανιχνεύσιμο HCV RNA ορού |
| Προετοιμασία εξεταζομένου |
Δεν υπάρχει καμία ειδική διαιτητική απαίτηση πριν από τη συλλογή δείγματος |
| Δείγμα |
Ορός που συλλέγεται σε συνήθη σωληνάρια δειγματοληψίας ή σε σωληνάρια που περιέχουν γέλη διαχωρισμού χωρίς έντονη αιμόλυση ,ίκτερο και έντονη λιπαιμικότητα. Αποχωρίζεται τον ορό από το θρόμβο ή τα κύτταρα εντός 2 ωρών και συντηρείται σε πλαστικό σωληνάριο. |
| Σταθερότητα δείγματος |
Για 72 ώρες σε θερμοκρασία 15-25 °C ή για 7ημέρες στους 2-8 °C ή για 6 μήνες στους -20°C. |
| Μη αποδεκτό δείγμα |
Δείγματα πλάσματος ηπαρίνης, αιμολυμένα δείγματα, δείγματα που δεν διαχωρίζονται εντός 6 ωρών από τη συλλογή τους ή δείγματα που εκτίθενται σε επαναλαμβανόμενη κατάψυξη/ απόψυξη. |
| Μεταφορά δείγματος |
0,5mL ως ελάχιστος όγκος σε θερμοκρασία 2-8 °C |
| Μέθοδος |
Ανοσοαποτύπωση (Western blot) |
| Τιμές αναφοράς |
Έκθεση αποτελεσμάτων |
| Παρατηρήσεις |
- Ο ιός της ηπατίτιδας C είναι μια από τις πιο σημαντικές αιτίες χρόνιας νόσου του ήπατος. Ευθύνεται για το 15% της οξείας ιογενούς ηπατίτιδας, το 60-70% της χρόνιας ηπατίτιδας και έως και το 50% της κίρρωσης, της ηπατικής νόσου τελικού σταδίου και του ηπατοκυτταρικού καρκίνου.
- Το γονιδίωμα του HCV αποτελείται από διάφορες λειτουργικές περιοχές: τον πυρήνα, το περίβλημα (περιλαμβανομένων των περιοχών E1 και E2) και τη μη δομική περιοχή (περιλαμβανομένων των NS2, NS3, NS4 και NS5). Οι ανοσοπροσδιορισμοί για την ανίχνευση αντισωμάτων κατά του HCV χρησιμοποιούν ένα συνδυασμό συνθετικών ή ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών ως αντιγόνα.
- Η εμφάνιση «μπάντας» στην περιοχή της κάθε πρωτεΐνης (έπειτα από επώαση με τον ορό του ασθενούς) υποδεικνύει την παρουσία αντισωμάτων έναντι της πρωτεΐνης αυτής.
- Για να θεωρηθεί μια δοκιμή ανοσοαποτύπωσης θετική θα πρέπει να εμφανιστούν τουλάχιστον 2 «μπάντες». Δοκιμή ανοσοαποτύπωσης με 1 μόνο «μπάντα» θετική συνήθως χρειάζεται επανάληψη, με νέο ορό ασθενούς, μετά από κάποιο χρονικό διάστημα. Η τεχνική αυτή είναι ιδιαίτερα χρήσιμη για τη διάκριση της περίπτωσης όπου η ανοσοδοκιμασία είναι θετική αλλά η PCR για HCV RNA είναι αρνητική. Αυτό θα μπορούσε να οφείλεται είτε σε ψευδώς θετική ανοσοδοκιμασία είτε σε ανάρρωση από HCV είτε σε συνεχιζόμενη λοίμωξη με HCV, αλλά με πολύ χαμηλό ιικό φορτίο. Θετικότητα μιας δοκιμής ανοσοαποτύπωσης αποκλείει την περίπτωση της ψευδώς θετικής ανοσοδοκιμασίας.
|
| Εκτέλεση |
Σε 72 ώρες |
