Μοριακός έλεγχος ηπατίτιδας C, Hepatitis C Virus (HCV) RNA Detection and Quantification by Real-Time Reverse Transcription-PCR (RT-PCR), Serum
|
Κλινική χρησιμότητα |
- Ανίχνευση της οξείας ηπατίτιδας C (HCV) (δηλαδή <2 μηνών από την έκθεση)
- Παρακολούθηση της εξέλιξης της νόσου σε ασθενείς με χρόνια HCV λοίμωξη και / ή την απόκριση σε αντι- HCV θεραπεία
|
Προετοιμασία εξεταζομένου |
Δεν υπάρχει καμία ειδική διαιτητική απαίτηση πριν από τη συλλογή δείγματος |
Δείγμα |
Πλάσμα EDTA ή ορός που συλλέγεται σε συνήθη σωληνάρια δειγματοληψίας ή σε σωληνάρια που περιέχουν γέλη διαχωρισμού χωρίς έντονη αιμόλυση ,ίκτερο και έντονη λιπαιμικότητα. Αποχωρίζεται τον ορό από το θρόμβο ή τα κύτταρα εντός 2 ωρών και συντηρείται σε πλαστικό σωληνάριο. |
Σταθερότητα δείγματος |
Για 72 ώρες σε θερμοκρασία 15-25 °C ή για 7ημέρες στους 2-8 °C ή για 6 μήνες στους -20°C. |
Μη αποδεκτό δείγμα |
Δείγματα πλάσματος ηπαρίνης, αιμολυμένα δείγματα, δείγματα που δεν διαχωρίζονται εντός 6 ωρών από τη συλλογή τους ή δείγματα που εκτίθενται σε επαναλαμβανόμενη κατάψυξη/ απόψυξη |
Μεταφορά δείγματος |
2x1,5mL ως ελάχιστος όγκος σε θερμοκρασία ≤-10°C |
Μέθοδος |
PCR TaqMan Roche, Αναλυτική ευαισθησία : 15 IU/mL |
Τιμές αναφοράς |
Εκφράζονται σε IU/ mL
Μη ανιχνεύσιμο HCVRNA
|
< 15 IU/ mL
|
|
Παρατηρήσεις |
- Ο ιός HCV είναι σφαιρικός ιός που περιβάλλεται από κάψα και ανήκει στην οικογένεια Flavivirideae. Το γενετικό υλικό αποτελείται από RNA μονής αλύσεως, είναι ανομοιογενές και μεταλλάσσεται, για να ξεφεύγει ο ιός από τον ανοσολογικό μηχανισμό, γεγονός που δυσκολεύει την ανεύρεση εμβολίου. Έτσι, έχουν δημιουργηθεί τουλάχιστον 6 διαφορετικοί γονότυποι που περιέχουν πολλές υποομάδες
- Ο ιός αυτός απομονώθηκε για πρώτη φορά το 1989 και αποτελεί σήμερα ένα από τα συχνότερα αίτια ηπατικής νόσου. Υπολογίζεται ότι το περίπου το 2% του συνολικού πληθυσμού της γης έχει μολυνθεί από τον ιό. Το ποσοστό οροθετικών ατόμων στη Δυτική Ευρώπη ανέρχεται περίπου στο 1%, ενώ σε μερικές μεσογειακές και ασιατικές χώρες φτάνει και το 3-4%. Στην Ελλάδα ο αριθμός των ατόμων που έχουν μολυνθεί από τον ιό της ηπατίτιδας C υπολογίζεται περίπου σε 100.000 άτομα, με πολλούς από τους πάσχοντες να μην το γνωρίζουν καν. Τα τελευταία χρόνια καταγράφονται περίπου 10.000-11.000 νέα κρούσματα και περίπου 400 θάνατοι ασθενών κάθε χρόνο. Η υψηλότερη συχνότητα ηπατίτιδας C συναντάται σε άτομα ηλικίας 40-60 ετών.
- Η εμμονή του HCV-RNA για τουλάχιστον 6 μήνες χαρακτηρίζει τη λοίμωξη ως χρόνια
- Οι μοριακές τεχνικές PCR μπορούν να ανιχνεύσουν μικρές ποσότητες ιικού RNA στον ορό. Οι τεχνικές αυτές είναι αξιόπιστες και ιδιαίτερα χρήσιμες σε περιπτώσεις με φυσιολογικά ή ελάχιστα αυξημένα επίπεδα ηπατικών αμινοτρανσφερασών, όταν δεν υπάρχουν αντι-HCV αντισώματα ή όταν απαιτείται διάκριση ανάμεσα σε πολλαπλές πιθανές αιτίες ηπατικής νόσου.
- Η δοκιμή αυτή δεν προορίζεται για χρήση ως διαγνωστική εξέταση για αίμα ή παράγωγα αίματος για την παρουσία HCV λοίμωξης ή ως διαγνωστική δοκιμή για να επιβεβαιώσει την παρουσία της λοίμωξης από τον εν λόγω ιό
- Η διάγνωση της χρόνιας HCV λοίμωξης δεν πρέπει να βασίζεται αποκλειστικά στην παρουσία HCV-RNA σε ένα μόνο δείγμα ορού.
|
Εκτέλεση |
Σε 4-8 ημέρες |